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小容量摇瓶机在菌种培养中的使用方法

发表时间:2017-07-25  |  点击率:607
     在进行小容量摇瓶机试验前,首先检查小容量摇瓶机各部件,检查气源、电源、管路、压力表、密封等是否正常,要求实验人员在操作前必须对小容量摇瓶机的各个按钮,流程熟练掌握,详细阅读摇瓶机说明书,及实验室仪器安全操作规程。掌握了小容量摇瓶机的基本操作要领后,逐步按以下步骤进行摇瓶机细菌培养试验:    
 
1、小容量摇瓶机复苏:
 
   根据所培养的细菌选择适宜的培养基,大部分细菌在LB培养基中在超净工作台先用1毫升左右的适宜的培养基溶解冷冻菌,然后转移到10毫升中试管(放入4毫升液体培养基)中,一般在37摄氏度摇床静止或低转速培养12小时或者过夜(温度取决于所培养的细菌适宜生长的温度)。    
 
2、摇瓶机平板划线培养:
 
   在平板(琼脂+液体培养基)划线,放37摄氏度培养箱培养箱中倒置培养6小时~12小时,在平板上观察是否形成了单菌落。
 
3、小容量摇瓶机挑单菌落:
 
   在超净台中挑选典型单菌落,置入10毫升中试管(内有5毫升液体培养基)中,在37摄氏度摇床,转速200转培养12小时或者过夜,肉眼能看到试管浑浊。  
 
4、小容量摇瓶机按照1:20的比例将中试管中的菌液移到250毫升三角瓶(放入100毫升液体培养基),培养条件同前。注意:所有的接种操作均需要在层流罩中,培养基应无菌。